甲基丙烯酸环氧丙酯致人支气管上皮细胞恶性转化研究

摘要

目的研究潜在致癌化学物甲基丙烯酸环氧丙酯（GMA）诱发人支气管上皮细胞恶性转化的作用。方法分别采用1、2、4、8μg/ml浓度的GMA多次处理人支气管上皮细胞（16HBE）,连续动态地观察细胞形态学的改变,通过刀豆凝集素A（conA）试验、软琼脂集落形成试验、电镜扫描和裸鼠体内致瘤性试验观察细胞的恶性转化表型,并运用免疫化学方法对细胞和肿瘤组织来源特性进行鉴定。试验同时设二甲基亚砜（DMSO）溶剂对照组和三甲基胆蒽（MCA）阳性对照组。结果1～8μg/ml浓度范围的GMA多次攻击可使16HBE细胞发生恶性转化,转化率随染毒剂量的增加而升高,其中8μg/ml染毒组的转化率（8.48×10-6）与对照组（4.5×10-7）相比差异有统计学意义（P＜0.01）。转化细胞失去接触抑制呈交错重叠生长并能在软琼脂上形成集落,各剂量组的集落形成率随染毒剂量的增加而升高,其中2、4、8 μg/ml染毒组的集落形成率分别为1.20‰、2.35‰和5.70‰,与溶剂对照组（0.30‰）相比差异有统计学意义（P＜0.01）。转化细胞对conA的凝集敏感性增加,扫描电镜下细胞表面微绒毛增多、变粗、变长。将转化细胞接种于裸鼠皮下可形成肿块,经病理组织学检查诊断为鳞状上皮细胞癌。16HBE细胞和肿块组织经免疫组织化学检测角蛋白呈阳性表达。结论 GMA可在体外诱发16HBE细胞发生恶性转化。