耐多药结核分枝杆菌pncA基因突变特征及与吡嗪酰胺耐药相关性研究

摘要

目的了解耐多药MTB的pncA基因突变特征及其与吡嗪酰胺（PZA）耐药之间的关系。方法收集2007—2009年深圳市耐多药MTB共127株,采用BACTEC MGIT 960系统检测其PZA耐药性,并用Wayne法检测吡嗪酰胺酶（PZase）活性;对pncA基因进行测序,分析其突变情况和分布特征,对PZA药物敏感性与PZase活性、pncA基因突变进行相关性分析。结果 127株耐多药菌株中有62株对PZA耐药,耐药率为48.8%。耐PZA菌株中有55株PZase阴性。62株耐药株中有48株发生了pncA基因突变,突变率为77.4%,突变形式包括碱基置换（33株）、移码突变（12株）和整码突变（3株）。48株pncA突变的耐药菌株中,PZase阴性为45株。全部65株敏感株酶活性均为阳性,其中1株菌株发生了pncA基因突变（N11D）。pncA基因突变分析中发现了5个新的突变类型位点:H57P、P62Q、G108R、D110Y、G162V。耐多药菌株对PZA的敏感性与PZase活性（r=0.895,P＜0.05）、pncA基因突变（r=0.779,P＜0.05）存在相关。结论 pncA基因突变类型多样,突变随机分布整个基因片段,发现了5个此前未曾报道过的新突变类型,所有突变主要分布于PZase活性位点和金属结合位点及其相邻区域上,且与PZA耐药存在较高相关性。