壳聚糖/肝素共价包被先天性心脏病介入封堵材料生物相容性的体外实验研究

摘要

目的 体外评价壳聚糖/肝素(Chi/Hep)共价包被先天性心脏病介入封堵材料的生物相容性.方法 在南京医科大学第一附属医院心血管内科于2005年11月至2006年10月,通过体外实验检测Chi/Hep共价包被镍钛合金片的血液相容性和细胞相容性.实验分成血液对照组、未包被组、基础包被组、Chi/Hep包被组,其中按肝素质量浓度又分为低(0.1 mg·mL-1)、中(1 mg·mL-1)、高(10 mg·mL-1)3个剂量组.Chi/Hep共价交联于试验用镍钛金属表面,(1)血液相容性实验:通过血液溶血试验,动态人全血接触试验评价其红细胞毒性及抗栓性能,扫描电子显微镜观察镍钛金属表面血小板粘附、聚集.(2)细胞相容性:利用纤维连接蛋白、Ki67免疫荧光标记人脐静脉内皮细胞(HUVECs)观察其细胞毒性.结果 (1)血液相容性实验:实验各组红细胞、白细胞、血小板计数均在正常范围内,且组间比较差异无显著性意义,各实验组溶血率均小于5%.Chi/Hep包被组部分凝血活酶活化时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)均明显延长,血液对照组、未包被组及基础包被组两两比较差异无显著性意义,不同质量浓度肝素包被之间差异亦无显著性意义(APTT、PT方差均齐LSD、SNK法检验,TT方差不齐Dunnetts法检验P＜0.05).扫描电镜结果显示,Chi/Hep包被组金属表面少量血小板粘附.(2)细胞相容性实验:经过与HUVECs 72 h孵育,金属片边缘细胞生长、移行良好,无细胞变形;Fn免疫荧光标记HUVECs,发现不同包被镍钛金属片表面的HUVECs粘附顺序如下:基础包被组＞未包被组＞Chi/Hep组;Ki67免疫荧光标记HUVECs,随机双盲法计数细胞发现不同包被镍钛金属片表面的HUVECs增殖顺序如下:基础包被组=未包被组＞Chi/Hep组(P＜0.01).结论 体外观察Chi/Hep共价包被镍钛金属有良好抗血栓作用,但抑制内皮细胞粘附、增殖.