孕期纳米银暴露对子代雌性成年小鼠乳腺干细胞分化的影响

摘要

目的 探讨孕期纳米银颗粒(Ag-NP)暴露对子代雌性成年小鼠乳腺干细胞数量和功能的影响,并研究其增加乳腺癌风险的潜在机制.方法 孕小鼠于孕第12天分别ig给予超纯水(正常对照组)或Ag-NP 5 mg·kg-1,7 d后停止暴露.取各组3月龄子代雌性小鼠,测量子宫长度和直径和体质量;洋红-硫酸铝钾染色观察乳腺导管形态,测量淋巴结面积;HE染色观察乳腺导管增生并定量增生比例;流式细胞术检测乳腺干细胞亚群比例;集落形成和免疫荧光实验检测管腔干细胞亚群集落百分比;免疫组织化学方法检测子代小鼠乳腺导管环氧化酶2(Cox-2)和信号转导和转录活化蛋白5(Stat5)蛋白表达水平.结果 与正常对照组相比,孕期暴露Ag-NP后子代小鼠的子宫长度和直径无显著影响,但体质量显著升高〔(25.7±2.5)g vs(18.3±2.7)g,P<0.01〕.洋红-硫酸铝钾染色发现,孕期暴露Ag-NP后子代成年雌性小鼠乳腺导管变细,结构发生紊乱.HE染色结果显示,与正常对照组相比,Ag-NP暴露组乳腺导管增生比例增加,为(54.6±2.8)％(P<0.05).流式结果显示,与正常对照组相比,管腔干细胞数目减少,为(1.1±0.2)％(P<0.01).集落形成和免疫荧光实验结果显示,与正常对照组相比,Ag-NP暴露组总集落数无显著差异,双阳性(K8+K14+)管腔干细胞亚群集落比例增加,为(78.2±2.2)％(P<0.05).免疫组化结果显示,与正常对照组相比,Ag-NP暴露组Cox-2和Stat5蛋白表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01).结论 孕期Ag-NP暴露导致乳腺干细胞分化的改变,引起干细胞数量的变化,从而增加乳腺癌的发生风险,而该影响可能与Cox-2/Stat5信号通路的激活有关.