克隆人神经母细胞瘤细胞株鲀毒素抵抗型钠通道的序列分析

摘要

目的为了弄清人神经母细胞瘤(NB-1)细胞上的鲀毒素抵抗型(TTX-R)电压依赖性钠通道的编码基因及分子特性.方法使用逆转录聚合酶链反应方法,对NB-1细胞TTX-R钠通道α亚单位进行克隆.结果该克隆命名为hNbR1, 其开放阅读框架(ORF)为2016个氨基酸残基.序列分析显示,hNbR1与心肌Nav1.5/SCN5A氨基酸相似性达99.1%,并具有电压依赖性钠通道的结构特点.4个相似的跨膜结构域(DⅠ～DⅣ),其中包括6个推定的α螺旋跨膜片段(S1～S6),每个结构域的电压感受器跨膜片段(S4)均有正电荷残基;在DⅠ的P-环存在的半胱氨酸残基(C373)提示该通道为TTX-R钠通道. DⅠS3～S4一个位于第3号染色体的新的外显子(第6A外显子)编码了该通道α亚单位.另外,一个删除了DⅡ～DⅢ第18外显子的选择性剪切体(hNbR1-2)被发现.结论Nav1.5/SCN5A比以往所知具有更加广泛的分布,而且发现一个新的外显子在神经肿瘤组织中编码了这个TTX-R钠通道的α-亚单位.