9-顺式维甲酸协同γ-干扰素诱导神经母细胞瘤分化、凋亡及生长抑制的实验研究

摘要

目的观察9-顺式维甲酸（9-cis retinoic acid,9-cis RA）联合γ-干扰素（gamma-interfer- on,γ-IFN）在体外诱导神经母细胞瘤（neuroblastoma,NB）SK-N-SH细胞分化、凋亡过程中细胞形态、周期的变化,探讨其协同作用的效果及其机制。方法将细胞分为A（对照组）、B（9-cis RA用药组）、C（γ-IFN用药组）和D（9-cis RA和γ-IFN联合用药组）4组,在处理后适当的时间分别观察细胞形态学变化,进行分化神经节细胞计数,用Hoechst-PI荧光染色法观察细胞的凋亡和死亡,四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定NB细胞抑制率,流式细胞仪（flow cytometry,FCM）检测细胞周期分布及其凋亡和死亡。结果联合用药组细胞形态学分化明显,神经节细胞分化率显著高于其他各组（P＜0.01）;MTT法测定显示联合用药能显著提高NB细胞抑制率并明显优于单独用药;Hoechst-PI荧光染色及FCM钙依赖性磷脂结合蛋白V和碘化丙啶(annexin V/PD染色法检测一致显示联合用药对于诱导NB细胞早期凋亡和坏死具有显著的协同作用;FCM细胞周期动力学分析发现联合用药组G0-G1期细胞比率增加,S期细胞比率减少。结论9-cis RA联合γ-IFN在体外对NB细胞的分化、凋亡和生长抑制能产生明显的协同作用,为其联合应用于临床提供理论依据和指导。