豚鼠围产期巨细胞病毒感染肝胆损伤模型的建立

摘要

目的建立围产期巨细胞病毒感染（CMV）肝胆损伤豚鼠模型,为探讨巨细胞感染对肝胆系统损伤的机制构建载体。方法分组①孕晚期（P组）:分为3组,孕40～43 d腹腔接种1×10~9TCID/ml病毒悬液1ml（P1组）、注射生理盐水（P2组）、不注射（P3组）。各组活产子鼠分别于生后12～24 h,生后10 d,生后20d取血液、肝脏及肝外胆道标本;②新生鼠（N组）:生后12～24 h腹腔注射1×10~8TCID)/ml病毒悬液1 ml。分别于生后10、20、30d取标本,同前;③幼鼠（Ⅰ组）:生后7～10d腹腔注射1×10~8TCID/ml病毒悬液1 ml 。分别于注射后10、20、30 d处死取标本。血液肝功能检测。肝脏及肝外胆道标本石蜡切片HE染色。部分标本冰冻切片原位杂交检测gpCMVmRNA在肝胆系统的表达。结果①肝功能:孕晚期病毒感染子鼠出生时及生后10 d TB、DB、ALT、AST均明显高于对照组（P＜0.05）;至生后20 d各指标均明显降低接近正常。P1d10组部分子鼠出现肉眼可见大便变白,伴TB和DB水平的升高。新生鼠病毒接种后10 dAST水平较20 d组和空白对照升高（P=0.027,P=0.043）;②子鼠生长发育:孕晚期感染子鼠出生体重明显低于对照组（P=0.002 9,P=0.002 7）。至生后20 d体重增长明显落后;③组织病理:63.6%的孕晚期感染小鼠肝脏存在单核淋巴细胞浸润为主的炎症病理改变,小叶间汇管区破坏和纤维化,合并小胆管增生。新生鼠仅生后即刻接种组出现肝脏病变（3/8）,但程度较孕晚期组明显减轻。幼鼠组未见明显肝脏病变。gpCMV阳性杂交信号表达于内皮上皮细胞及汇管区基质内,肝细胞内未见表达。孕晚期感染小鼠gpCMV阳性率17.27%,低于新生组和幼鼠组子鼠肝胆系gpCMV-mRNA阳性率（55%,50%,P=0.011＜0.05）。结论孕晚期和出生后即刻腹腔接种未经strain-2传代gpCMV病毒可导致子代豚鼠的感染和肝胆系统炎症损伤。