小儿肾母细胞瘤血清创伤应激相关因子的筛选与鉴定

摘要

目的筛选并鉴定小儿肾母细胞瘤血清创伤应激相关因子,提高肾母细胞瘤血清特异蛋白标志物的敏感性和准确度。方法将样品分组进行SELDI-TOF-MS检测,筛选特异性差异蛋白质,然后用HPLC和MALDI-TOF-MS对差异血清蛋白进行纯化,酶解蛋白质样品后,LC-Ms/MS测定该蛋白酶解肽段,将所得PMF经Mascot检索程序查询连接蛋白质序列Swissprot数据库,进行数据库检索,并应用Western blotting对于以上筛选及鉴定的差异性蛋白质进行验证。结果 SELDITOF-MS检测筛选出m/z位于5 816的差异性蛋白质,在肾母细胞瘤组高表达（强度为2128.3±137.2）,正常小儿组明显低表达（强度为30.4±7.8）,差异有统计学意义（P＜0.01）,经交叉检测,在测试集上判别该标志物组合模型的特异性为100%,敏感度为100%。正常血清组和创伤应激血清组比较筛选到差异最显著的m/z位于5 816的蛋白质标志物,在创伤组血清中高表达（强度为3674.6±255.7）,正常组中呈明显低表达（强度为30.4±7.8）,差异有统计学意义（P＜0.01）。经鉴定及验证此差异性蛋白质为硫氧还蛋白1（thioredoxin Trx1）。结论小儿肾母细胞瘤血清中含创伤应激相关炎症因子:硫氧还原蛋白1（thioredoxin Trx1）。