胶质细胞源性神经营养因子在肛门直肠畸形胎鼠直肠末端的表达及意义

摘要

目的检测胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）在肛门直肠畸形胎鼠直肠末端组织中的表达,探讨其可能与肠壁神经系统发育的关系。方法 SD大鼠数字随机分对照组和乙烯硫脲致畸ARM组,两组孕鼠在孕20d手术取出宫内胎鼠,对胎鼠盆腔会阴部矢状面HE染色,免疫组化、Western blot方法检测对照组和ARM胎鼠直肠末端GDNF蛋白定位及定量表达情况,qRT-PCR方法检测两组GDNF mRNA的表达差异。结果 HE染色显示:ARM胎鼠肛门为一闭合盲端,无正常肛门结构,直肠盲端为增生鳞状上皮组织及增厚的肌层,各层组织结构分层不清,直肠末端黏膜下和肌间神经丛数目较对照组明显减少（43.10±8.60比88.90±10.65,P＜0.01）。免疫组化结果显示GDNF在对照组及ARM组直肠末端黏膜层,黏膜下及肌间神经丛中均有表达,ARM组平均积分光密度（IOD值）明显低于正常组（238.32±41.67比500.93±90.10,P＜0.01）。Western blot及qRTPCR结果显示在ARM组胎鼠直肠末端组织中GDNF总蛋白及mRNA明显低于对照组（0.43±0.09比0.61±0.06;72.00±33.47比125.17±66.28,P＜0.05）。结论 GDNF在肛门直肠畸形胎鼠直肠末端表达下调,可能与其肠壁神经系统发育不良有关。