hsa-miR-103a-3p影响食管鳞状细胞癌细胞化疗耐药性的机制研究

摘要

目的:探讨hsa-miR-103a-3p影响食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞对奥沙利铂(oxaliplatin,OXA)耐药的机制。方法:采用RT-qPCR验证测序结果中hsa-miR-103a-3p在不同ESCC细胞系中的表达;转染hsa-miR-103a-3p mimics或inhibitor,验证hsa-miR-103a-3p是否可以逆转ESCC细胞系的耐药表型。应用双萤光素酶报告基因实验和RT-qPCR验证hsa-miR-103a-3p与RASSF8(Ras association domain family member 8)的靶向调控关系;挽救实验验证改变RASSF8的表达是否可以逆转由hsa-miR-103a-3p引起的耐药表型。PCR-array实验检测hsa-miR-103a-3p参与ESCC的耐药机制;Kaplan-Meier生存分析预测hsa-miR-103a-3p高表达与患者生存时间的关系。结果:hsa-miR-103a-3p在OXA敏感ESCC细胞系中高表达(P<0.05);hsa-miR-103a-3p的表达影响ESCC细胞对OXA的敏感性(P<0.05);与对照组相比,过表达hsa-miR-103a-3p能够降低RASSF83’端非翻译区萤光素酶报告基因质粒的活性(P<0.05);挽救实验结果显示,改变RASSF8的表达可有效挽救由hsa-miR-103a-3p引起的耐药表型(P<0.05)。PCR-array实验结果显示,RASSF8高表达能够促进XPA(xeroderma pigmentosum complementation group A)和XPC(xeroderma pigmentosum complementation group C)表达。配对t检验分析结果显示,hsamiR-103a-3p在肿瘤组织中高表达;Kaplan-Meier生存分析显示,与hsa-miR-103a-3p低表达的患者相比,hsa-miR-103a-3p高表达的患者生存时间显著缩短(P<0.05)。结论:hsa-miR-103a-3p低表达通过靶向上调RASSF8的表达促进ESCC细胞对OXA耐药。