缺氧诱导因子通过FOXC1促进脑胶质瘤细胞侵袭

摘要

目的:探究在缺氧情况下,缺氧诱导因子(HIF)能否改变胶质瘤细胞内叉头框蛋白C1(FOXC1)的表达水平,并对胶质瘤细胞的侵袭产生影响.方法:通过RT-qPCR和Western blot实验检测正常氧条件及缺氧条件下胶质瘤细胞系U87和U251中FOXC1的mRNA和蛋白表达水平以及HIF-1α和HIF-2α的蛋白水平变化.缺氧情况下,在胶质瘤U87和U251细胞系中分别转染HIF-1αsiRNA和HIF-2αsiRNA,通过Western blot检测转染HIF-1αsiRNA和HIF-2αsiRNA后U87和U251细胞中FOXC1的蛋白水平变化.体外Transwell实验比较正常氧条件和缺氧情况下U87细胞和U251细胞的侵袭能力,检测转染FOXC1 siRNA后胶质瘤细胞系U87和U251侵袭能力改变及与侵袭能力相关标志蛋白(N-cadherin、E-cadherin和vimentin)的表达水平.结果:缺氧条件下,FOXC1的mRNA和蛋白表达明显升高,HIF-1α和HIF-2α的蛋白水平也明显升高,并随缺氧程度的增加而升高(P<0.05);缺氧情况下,将HIF-1αsiRNA转染至胶质瘤细胞系U87和U251后,发现细胞系中FOXC1的蛋白表达水平较阴性对照组无明显变化;转染HIF-2αsiRNA后,U87细胞系和U251细胞系中FOXC1的蛋白表达水平较阴性对照组明显降低(P<0.05);缺氧条件下,胶质瘤细胞系U87和U251的侵袭能力较正常氧条件下强(P<0.05).但转染FOXC1 siRNA后,U87和U251细胞的侵袭能力较阴性对照组明显减弱,且侵袭相关标志蛋白N-cadherin和vimentin的表达降低,E-cadherin的表达升高(P<0.05).结论:缺氧情况下,HIF-2α通过升高FOXC1的表达,进而增强恶性胶质瘤细胞的侵袭能力.