TXNIP通过诱导氧化应激促进心肌纤维化的发生

摘要

目的:探讨硫氧还蛋白-互作蛋白(TXNIP)在心肌纤维化发生过程中的表达变化及其潜在调节机制.方法:通过皮下泵入血管紧张素(Ang)Ⅱ建立心肌纤维化小鼠模型,Western blot检测TXNIP在心肌纤维化小鼠和假手术组小鼠心肌组织中的表达差异.分离和培养新生大鼠的心肌成纤维细胞(CFs),外源性使用人重组AngⅡ和(或)losartan处理CFs,用Westernblot和细胞免疫荧光检测TXNIP表达的变化.构建TXNIP的小干扰RNA(siRNA),利用细胞划痕实验、结晶紫染色、Western blot以及细胞活性氧簇探针等多种方法检测TXNIP对AngⅡ刺激状态下CFs迁移、纤维激活相关蛋白[I型胶原蛋白(ColⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)、波形蛋白(vimentin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]表达、氧化应激及MAPK信号通路的影响.结果:TXNIP在心肌纤维化小鼠的心肌组织中表达上调.AngⅡ可浓度和时间依赖性地促进CFs中TXNIP表达上调,这种效应可以被losartan完全抵消.敲减TXNIP可以显著抑制AngⅡ诱导的CFs迁移及ColⅠ、ColⅢ、vimentin和α-SMA表达升高.此外,敲减TXNIP可以抑制AngⅡ诱导的细胞氧化应激和MAPK信号通路激活.结论:TXNIP可能通过MAPK信号通路诱导CFs发生氧化应激,进而促进心肌纤维化的发生;TXNIP可能成为治疗心肌纤维化的新靶点.