绞股蓝不同有效成分对ox-LDL诱导的内皮细胞线粒体能量代谢相关蛋白表达的影响

摘要

cqvip:目的:探讨绞股蓝不同成分[绞股蓝总皂苷(Gps)、绞股蓝皂苷XLIX(GpXLIX)和人参皂苷Rb3(GRb3)]对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞线粒体能量代谢相关蛋白的影响。方法:将人脐静脉内皮细胞融合细胞EA.hy926分为对照组、模型组、Gps组、GpXLIX组和GRb3组。对照组仅用DMEM完全培养基培养;模型组予以100 mg/L ox-LDL诱导内皮细胞48 h;Gps组、GpXLIX组和GRb3组在加入100 mg/L ox-LDL作用24 h后,再分别加入100 mg/L Gps、GpXLIX和GRb3处理24 h。采用ELISA法检测各组细胞ATP含量,采用Wes全自动蛋白质印迹定量分析系统及Western blot法检测线粒体能量代谢相关蛋白细胞色素C氧化酶5a亚基(Cox5a)、NADH:泛醌氧化还原酶核心亚基S1(Ndufs1)、ATP合成酶F1亚基α(ATP5a)及细胞色素C(Cyt C)的表达。结果:与对照组比较,模型组细胞ATP含量有所降低(P<0.01);与模型组相比,Gps组、GpXLIX组和GRb3组细胞ATP含量均不同程度地升高(P<0.01)。Wes全自动蛋白质印迹定量分析系统与Western blot法结果基本一致,均显示模型组细胞Cox5a、Ndufs1和ATP5a的蛋白表达与对照组比较显著减少,Cyt C的蛋白表达显著增多(P<0.01);与模型组相比,Gps、GpXLIX和GRb3均不同程度地促进Cox5a、Ndufs1和ATP5a的蛋白表达,减少Cyt C的蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。Gps对Cox5a、Ndufs1和Cyt C蛋白表达的影响明显强于2个单体成分,在2个单体成分中则是GRb3的效果为优;而对ATP5a蛋白的影响,GpXLIX优于另外2个药物。结论:绞股蓝总皂苷及相关有效成分可以通过影响线粒体能量代谢相关蛋白发挥对ox-LDL诱导的内皮细胞的保护作用。