益气养阴方通过激活ERK/Nrf2/HO-1通路减轻糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤

摘要

cqvip:目的:探究益气养阴方对糖尿病(DM)大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用及可能的机制。方法:将健康雄性SD大鼠随机分为:正常(control)组,DM假手术(DM-S组)组,DM+MIRI组,益气养阴方低、中和高剂量组(灌胃7.5、15和30 g/kg益气养阴方水煎液),Nrf2激活剂(bardoxolone methyl)组(每天灌胃大鼠30 mg/kg bardoxolone methyl,灌胃量1 mL/kg)。每组均15只大鼠,连续给药7 d。末次给药结束后采集尾静脉血,对大鼠血糖血脂水平进行检测;ELISA法检测血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-10的水平;血液采集后,采用超声检测大鼠心脏功能的变化;心功能检测后,处死大鼠获取心脏组织,采用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色评估心肌梗死体积变化;苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织病理形态学变化;TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况;Western blot检测心肌组织磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)的蛋白水平;氮蓝四唑显色法检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活力,硫代巴比妥酸比色法检测丙二醛(MDA)水平,铁离子还原法检测活性氧簇(ROS)的水平。结果:与control组相比,DM-S组和DM+MIRI组的空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平显著升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著降低(P<0.05);与DM-S组和DM+MIRI组相比,益气养阴方各组与bardoxolone methyl组的FBG、TC和TG水平显著降低,HDL-C水平显著升高(P<0.05)。与control组和DM-S组相比,DM+MIRI组的心率(HR)和左心室舒张末压(LVEDP)升高,平均动脉压(MAP)、左心室收缩压(LVSP)和左室射血分数(LVEF)降低,血清cTnI、TNF-α、IL-1β和IL-10水平升高,心肌梗死体积百分比升高,大鼠心肌细胞破碎、坏死数量增多,心肌细胞凋亡率升高,p-ERK1/2、Nrf2和HO-1蛋白水平均降低,MDA和ROS水平均升高,SOD活力降低(P<0.05)。与DM+MIRI组相比,益气养阴方各组与bardoxolone methyl组的HR和LVEDP降低,MAP、LVSP和LVEF升高,血清cTnI、TNF-α、IL-1β和IL-10水平降低,心肌梗死体积百分比降低,大鼠心肌细胞破碎、坏死减少,心肌细胞凋亡率降低,p-ERK1/2、Nrf2和HO-1的蛋白水平均升高,MDA和ROS水平降低,SOD活力升高(P<0.05)。结论:益气养阴方可保护DM+MIRI大鼠的心肌组织,减轻组织氧化应激水平,其效应可能是通过激活ERK/Nrf2/HO-1通路实现的。