酪醇诱导肝癌细胞NQO1酶基因表达增加及细胞增殖的抑制

摘要

目的:研究酪醇诱导肝癌细胞Ⅱ相脱毒酶NAD(P)H:醌氧化还原酶-1(NQO1)基因表达情况和对细胞增殖的影响以及两者之间的关系.方法: 肝癌细胞SMMC-7721接种后24 h经β-酪醇处理24 h,分别测定NQO1酶活性,mRNA表达和细胞增殖情况.NQO1酶活性采用微孔板直接测定法,诱导结果用NQO1酶比活性=NQO1酶活性/细胞数;mRNA水平的变化采用定量RT-PCR;细胞增殖采用结晶紫显色法. 结果:NQO1酶活性诱导上,酪醇大于60 mg/L时有明显的剂量效应关系,且每一浓度点(60 mg/L, 70 mg/L, 80 mg/L, 90 mg/L)与空白组比较均有显著差异(P＜0.05),80 mg/L的酪醇与80 μmol/L的β-NF(阳性对照)诱导的酶比活性相当;mRNA表达量存在剂量依赖性增加(r=0.824,P＜0.05),且与酶比活性存在明显的相关性(r=0.951, P＜0.01);酪醇在70 mg/L-100 mg/L范围内,其抑制细胞增殖的能力随着浓度的增加而增加.另外,细胞增殖与酶比活性呈负相关(r=-0.410,P＜0.01). 结论: 酪醇在培养肝癌细胞SMMC-7721上能使NQO1酶活性与mRNA表达量诱导性增加,同时酪醇能抑制细胞的增殖,这种增殖抑制与酶活性诱导增加有关.