小鼠白细胞介素12基因转染及其在黑色素瘤细胞B16F10中的表达

摘要

目的:探索小鼠白细胞介素12(mIL-12)基因在小鼠黑色素瘤B16F10细胞中的表达.方法:应用DNA重组技术将mIL-12基因插入pcDNA3.1真核表达载体中,通过电穿孔转染B16F10细胞,筛选出阳性细胞克隆后,应用PCR、RT-PCR及Western blot技术检测mIL-12基因在B16F10细胞中的整合及表达.结果:在DNA、mRNA及蛋白质3个水平均证实mIL-12基因已转染到B16F10细胞中并表达.结论:mIL-12基因可成功地转染体外培养的B16F10细胞并表达,为进一步研究IL-12基因修饰的肿瘤细胞的基因瘤苗奠定了基础.