儿茶素通过蛋白激酶B抑制兔晶状体上皮细胞增殖

摘要

目的:探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)抑制兔晶状体上皮细胞增殖时,磷脂酰肌醇-3(羟基)激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB)信号转导通路所起的作用.方法:用组织块培养法获取新西兰白兔晶状体上皮细胞,用噻唑蓝比色法(MTT比色法)研究晶状体上皮细胞增殖作用;用Western blot法研究PKB的磷酸化和非磷酸化水平.结果:(1)预先分别加入25,50μnol/L的PI3K的特异性抑制剂LY294002孵育1 h后,100、200μmol/LEGCG对晶状体上皮细胞的抑制率明显大于对照组(P＜0.05),而50μmol/L EGCG无抑制作用(P＞0.05).(2)在晶状体上皮细胞,磷酸化的PKB基础水平很高;加入200μmol/L EGCG时PKB磷酸化水平轻度增加,但随EGCG浓度的下降而逐渐减弱;加入EGCG后早期,PKB的磷酸化水平最高,随时间的延长而逐渐下降.各组的非磷酸化PKB水平始终保持不变.结论:EGCG可能通过调控PKB的磷酸化水平而抑制晶状体上皮细胞的增殖,并不影响总蛋白含量.