水飞蓟素在紫外线照射诱导A375-S2细胞凋亡中发挥抑制作用

摘要

目的:从天然药物中筛选出抑制紫外线照射诱导人黑色素瘤细胞A375-S2凋亡的有效单体.方法:MTT法测定细胞生长抑制率;形态学观察,DNA凝胶电泳及LDH法;用半胱天冬酶活力检测试剂盒测定半胱天冬酶活力;用免疫印记法检测Bcl-2家族成员(Bcl-2,Bcl-Xl和Bax)的表达.结果:紫外线照射(2.4 J/cm2,5min)能显著诱导A375-S2细胞发生凋亡,其作用呈明显时间依赖性.形态学观察可见凋亡小体的形成,琼脂糖凝胶电泳可见凋亡典型的DNA梯带;水飞蓟素具有抑制紫外线照射(2.4 J/cm2,5 min)诱导A375-S2细胞凋亡的作用,水飞蓟素作用于紫外线照射(2.4 J/cm2,5 min)的A375-S2细胞,培养12 h,使紫外线照射诱导的半胱天冬酶-9、半胱天冬酶-3的活力降低;免疫印记法检测发现水飞蓟素作用的A375-S2细胞(紫外线照射)中Bcl-2 蛋白和Bcl-Xl蛋白的表达增加.结论:水飞蓟素明显抑制紫外线照射诱导的A375-S2细胞的凋亡,其抑制凋亡作用与半胱天冬酶途径和线粒体途径相关.