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BHA通过ERK信号转导途径促进小鼠胎肝细胞神经组织细胞特异基因表达的研究

     

摘要

目的:了解丁羟回香醚(BHA)对小鼠胎肝(FL)细胞神经组织特异基因表达的影响及其信号途径.方法:采用MACS试剂盒分离小鼠胚胎肝Sca-1+细胞,以DMEM+10%胎牛血清培养液培养;第4 d后,加入或者不加入细胞外信号调节蛋白激酶特异抑制剂PD98059(25μmol/L)处理24h,再加入BHA处理24h(0.2 mmol/L).然后在无血清培养基中培养5 d.用Western blotting和半定量RT-PCR方法分析BHA处理前后基因表达.结果:经BHA诱导处理后,细胞表达神经组织细胞特异蛋白显著增加如神经丝轻链(NF-L)、神经丝重链(NF-H)、脑因子1(BF-1)和酪氨酸羟化酶(TH).NF-L、NF-H、BF-1和TH分别增加6.32倍、2.73倍、3.37倍、2.68倍.而PD98059能明显抑制BHA诱导的神经组织细胞特异蛋白NF-L、NF-H、BF-1和TH的表达.结论:BHA通过细胞外信号调节蛋白激酶途径促进小鼠FL Sca-1+细胞表达神经组织细胞特异抗原、结构和功能基因.

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