缺氧预适应抑制缺氧/复氧诱导心肌细胞凋亡的作用及机制

摘要

目的:研究缺氧预适应(HP)对缺氧复氧(H/R)诱导新生大鼠心肌细胞凋亡的影响及其作用机制.方法:体外培养新生大鼠心肌细胞,分3组:正常对照组、HP+H/R组和H/R组,吖啶橙(AO)染色法观察心肌细胞凋亡形态学特征,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,比色法检测心肌细胞caspase-3的活性,免疫组织化学法结合计算机图像分析检测心肌细胞Bcl-2蛋白的表达.结果:心肌细胞H/R损伤后,AO染色可见典型凋亡细胞,流式细胞仪检测其凋亡率为(29.7±5.4)%,BP可显著降低心肌细胞凋亡率至(7.8±1.3)%(P＜0.01).H/R组心肌细胞caspase-3的相对活性为5.9±0.8,Hp+H/R组心肌细胞caspase-3的相对活性为2.6±0.5,显著低于H/R组(P＜0.01).Bcl-2在正常心肌细胞即有表达,其阳性染色吸光度值为119.4±7.1,H/R组为99.6±5.0,显著低于正常组(P＜0.01),HP+H/R组为126.5±6.2,显著高于H/R组(P＜0.01).结论:HP可通过增加心肌细胞Bcl-2的表达、降低caspase-3活性而抑制H/R诱导的心肌细胞凋亡,发挥心肌细胞保护作用.