转化生长因子胞内信号蛋白Smad2/3在糖尿病大鼠肾脏表达的动态观察及意义研究

摘要

目的:动态观察大鼠糖尿病肾病发生发展过程中TGF-β1及其下游信号分子Smad2/3在肾脏的表达及定位变化,探讨TGF-β1-Smad2/3信号通路在糖尿病肾病(DN)肾纤维化发病机制中的作用.方法:链脲菌素诱导大鼠糖尿病肾病,以免疫组化、Western blotting及荧光实时定量PCR(RT-PCR)的方法动态观察糖尿病肾病发生发展过程中大鼠肾脏TGF-β1、Smad2/3蛋白及mRNA表达,并以RT-PCR方法观察结缔组织生长因子(CTGF)、胶原-3(COL-Ⅲ)、纤溶酶原激活剂抑制因子-1(PAI-1)mRNA表达.结果:TGF-β1在糖尿病肾病(DN)大鼠肾小管表达明显多于正常组(P＜0.05);Smad2/3蛋白主要以胞浆表达阳性为主,部分呈胞核表达阳性;Smad2/3蛋白及mRNA从2周起表达明显多于正常对照组(P＜0.05),且随着糖尿病进展有逐渐增加的趋势.16周DN组大鼠肾脏TGF-β1、Smad2、CTGF、COL-Ⅲ、PAI mRNA表达显著高于正常对照组(P＜0.05).结论:TGF-β1-Smad2/3信号转导通路参与了糖尿病肾病肾脏纤维化形成的信号转导过程,伴随着Smad2/3信号蛋白表达的增多及入核增加,CTGF、COL-Ⅲ、PAI-1等基因转录增加,导致肾脏细胞外基质的大量沉积,这是细胞因子TGF-β1导致糖尿病肾病肾纤维化进展可能的信号转导途径之一.