bHLH家族基因对hTERT启动子转录活性的调节研究

摘要

目的:研究bHLH家族基因中c-myc和mad1对人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子的转录调节.方法:采用脂质体DOTAP转染法将装载有虫荧光素酶基因的野生型hTERT启动子(Tw)和突变型hTERT启动子(Td)质粒,与含c-myc或mad1基因的质粒,以不同方式组合分别转染至膀胱癌T24细胞、EJ细胞、猴肾母COS-7细胞和人成纤维细胞,培养48h后检测各组虫荧光素酶活性.结果:在膀胱癌T24和EJ细胞中,Tw组转录活性显著高于对照组,亦高于Td组.在T24和EJ细胞中,c-myc可呈剂量依赖地上调Tw的转录活性,但负性调节Td转录;而mad1负性调节Tw转录,但上调Td的转录活性.c-myc和mad1联合可下调膀胱癌细胞Tw的转录.结论:c-myc和mad1可对hTERT启动子进行转录调节,并且高度依赖于bHLH家族基因的接合位点E-box的序列保守性.