喜树碱对小鼠T淋巴细胞活化、增殖以及细胞周期的影响

摘要

目的:研究喜树碱(CPT)对刀豆蛋白A (ConA)介导的小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖及细胞周期的影响.方法:以ConA刺激小鼠T淋巴细胞,建立小鼠T淋巴细胞活化、增殖的模型,以不同浓度的CPT作用于该模型,流式细胞术检测T细胞早期活化标志CD69分子的表达;以活体染料羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色流式细胞术分析CPT在Con A刺激下小鼠淋巴细胞的增殖相关指数(PI);以碘化丙啶染色流式细胞术分析细胞周期的分布情况.结果:ConA作用6h后流式细胞术分析显示CD69的表达率为(58.88±0.55)%,不同浓度的CPT组(10nmol/L、 20nmol/L、 50nmol/L、 100nmol/L) CD69的表达率分别为(55.48±0.98)%、(54.67±1.05)%、(50.40±0.82)%、(42.47±1.32)%,均可明显抑制CD69的表达(P<0.01); ConA刺激48h后流式细胞术分析显示,不同浓度的CPT组(10nmol/L、 20nmol/L、50nmol/L、100nmol/L)的增殖指数(PI)明显低于对照组(P<0.05);细胞周期分析显示刺激48h后不同浓度的CPT组(10nmol/L、 20nmol/L、50nmol/L100nmol/L)均出现明显的凋亡峰(apoptosis peak, AP), sub-G1期、G0/G1期细胞的比率明显高于ConA刺激组(P<0.01).结论:CPT可明显抑制ConA刺激的T淋巴细胞的活化、增殖,同时使淋巴细胞阻滞于G0/G1期.