霍奇金淋巴瘤亚型Richter综合征免疫球蛋白重链可变区基因突变及克隆相关性分析

摘要

目的检测霍奇金淋巴瘤（HL）亚型 Richter 综合征免疫球蛋白重链可变区（IgVH）基因重排、突变、克隆相关性等基因特征及其与预后的关系,初步探讨其可能涉及的分子机制。方法用基因扫描分析 HL 亚型 Richter 综合征及慢性 B 淋巴细胞性白血病（B-CLL）伴 CD30阳性 R-S 细胞样细胞病例 IgVH 基因的克隆性重排,测序分析 IgVH 基因的突变状态及其分子特征;用激光显微切割结合半套式 PCR 扩增 R-S 细胞和 R-S 细胞样细胞的 IgVH 基因,比较两种肿瘤成分的克隆相关性;用免疫组织化学 LAB-SA 法检测两种肿瘤中 zeta 相关蛋白70（ZAP70）、p53、干扰素调节因子4（IRF-4）及 EB 病毒潜伏膜蛋白-1（LMP1）等因子表达的不同。结果 （1）6例向 HL 转化及6例向R-S 细胞样细胞转化的 B-CLL 患者中,携带突变型 IgVH 基因的患者各占5例;（2）4例 IgVH 基因克隆相关性分析中,与相应 B-CLL 克隆不相关的2例 R-S 细胞和1例 R-S 细胞样细胞表达 LMP1。而1例与 B-CLL 来自相同克隆的 R-S 细胞样细胞不表达 LMP1;（3）HL 亚型 Richter 综合征中 B-CLL 肿瘤细胞常使用的 IgVH 基因是 VH3和 VH4家族,6例中各有2例使用 VH4-34和 VH3-48基因。结论（1）转化的 HL 和 R-S 细胞样细胞主要与生发中心或生发中心后的 B-CLL 有关,提示不同类型的Richter 综合征可能涉及的发病机制不同;（2）HL 与 R-S 细胞样细胞既可以是 B-CLL 克隆相关病例,也可以是克隆不相关的病例。而后者可能与 B-CLL 患者免疫抑制后继发 EB 病毒感染有关;（3）IgVH 基因在 HL 亚型 Richter 综合征 B-CLL 中的偏向性使用,提示抗原在转化中的作用。