硫化氢及其合成酶抑制剂对小鼠急性胰腺炎自噬功能的影响

摘要

目的探讨给予外源性硫化氢（H2S）及其合成酶抑制剂炔丙基甘氨酸（PAG）对雨蛙素诱导的小鼠急性胰腺炎（AP）自噬功能的影响。方法 60只雄性BALB/c小鼠,按数字表法随机分为对照组、AP组、硫氢化钠（NaHS）组、PAG组。采用连续6次腹腔注射雨蛙素（50μg/kg体重）、每次间隔1 h的方法建立小鼠AP模型。NaHS组及PAG组在造模前1 h分别腹腔注射NaHS 10 mg/kg体重、PAG50 mg/kg体重,对照组及AP组小鼠腹腔注射等容积生理盐水。于第1次注射雨蛙素12 h后处死小鼠,取血检测血清淀粉酶、脂肪酶含量,采用去蛋白分光光度法测定血清H2S含量;取部分胰腺组织常规行病理学检查并进行病理评分;采用Real-time PCR法检测胰腺组织硫化氢合成酶胱硫醚-γ裂解酶（CSE）mRNA表达,蛋白质印迹法检测胰腺组织自噬相关的微管相关蛋白轻链3-Ⅱ（LC3-Ⅱ）与LC3-Ⅰ的比值及泛素结合蛋白（p62）的表达。结果对照组血清淀粉酶、脂肪酶、H2S浓度及胰腺组织CSE mRNA、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值和p62表达量分别为（2 700±100）U/L、（70±20）U/L、（22.9±1.7）mmol/L、1.0±0.1、0.419±0.080、0.227±0.140;AP组小鼠分别为（17 290±500）U/L、（520±40）U/L、（31.3±3.0）mmol/L、5.4±0.4、1.184±0.120、1.985±0.210;NaHS组分别为（27 784±1 200）U/L、（900土80）U/L、（38.6±3.3）mmol/L、6.9±0.9、1.600±0.210、4.229±0.050;PAG组分别为（13 750±2 000）U/L、（370±20）U/L、（24.5±2.1）mmol/L、4.2±0.5、0.745±0.130、1.203±0.080。AP组上述指标均显著高于对照组,NaHS组又较AP组进一步显著升高,而PAG组较AP组显著降低,差异均有统计学意义（P值均＜0.05）。NaHS组胰腺病理损伤较AP组进一步加重,而PAG组胰腺病理损伤较AP组显著减轻。结论 PAG能够降低血清淀粉酶、脂肪酶水平,减轻AP时自噬功能的受损状况,减轻AP的严重程度。