干扰素α-1b抑制裸鼠肝异位鼻咽癌种植瘤生长和转移的研究

摘要

目的观察干扰素α-1b 对裸鼠肝异位鼻咽癌细胞株 CNE-2种植瘤生长和转移的作用并探讨其机理;比较重组腺相关病毒（recombinant adeno-associated virus,rAAV）载体介导干扰素α-1b（interferon-α-1b,IFN-α-1b）基因治疗与 IFN-α-1b 蛋白治疗的优势。方法鼻咽癌细胞株 CNE-2裸鼠肝包膜下注射,建立裸鼠肝脏鼻咽癌异位种植瘤动物模型;采用随机数字表法将40只裸鼠随机分为A～D组,每组10只;24h 后分别经尾静脉注射。A 组:重组腺相关病毒携带人 IFN-α-1b（rAAV-IFN-α-1b）,C 组:重组腺相关病毒携带增强型绿色荧光蛋白基因（rAAV-EGFP）,D 组:磷酸缓冲液;建模5d 后 B 组:皮下注射入 IFN-α-1b,1次/隔日;3周后每组随机取5只裸鼠断髓处死,观察肝脏成瘤、肺转移及生存期情况,测量肿瘤体积大小,计算抑瘤率,原位末端标记法检测肿瘤细胞凋亡指数;高效液相芯片技术检测外周血中人 IFN-α、小鼠 IL-12的含量,另5只裸鼠观察生存期。结果肝脏鼻咽癌异位种植瘤3周后,肿瘤平均体积（±s）分别为 A 组（0.114±0.116）cm~3、B 组（0.422±0.137）cm~3、C 组（2.476±0.637）cm~3、D 组（2.677±0.704）cm~3,组间比较差异有统计学意义（F=38.536,P＜0.01）;相对对照 D 组,A 组和 B 组抑瘤率分别为95.74%、84.24%;A、B、C、D 组肺转移率分别为0.0%、0.0%、40.0%、60.0%;凋亡平均指数分别为（21.88±3.29）%、（19.85±1.96）%、（4.37±0.50）%、（3.40±1.05）%,组间比较差异有统计学意义（F=120.964,P＜0.01）;血清中人 IFN-α平均含量分别为（101.50±11.33）pg/ml、（91.55±9.80）pg/ml、（23.06±4.36）pg/ml、（16.93±9.96）pg/ml,组间比较差异有统计学意义（F=69.128,P＜0.01）;IL-12平均含量分别为（80.36±13.35）pg/ml、（51.15±9.72）pg/ml、（19.44±7.03）pg/ml、（14.49±4.21）pg/ml,组间比较差异有统计学意义（F=57.116,P＜0.01）;平均生存期分别为（55.80±2.77）d、（48.20±2.39）d、（35.40±2.61）d、（36.80±1.92）d,组间比较差异有统计学意义（X~2=25.623,P＜0.01）。结论 IFN-α-1b 能有效抑制裸鼠肝异位鼻咽癌细胞株 CNE-2种植瘤生长和转移,重组腺相关病毒介导 IFN-α-1b 基因治疗效果优于 IFN-α-1b 蛋白。