硫酸新霉素对新生大鼠离体培养耳蜗毛细胞的毒性作用研究

摘要

目的 观察体外培养的新生大鼠耳蜗Corti器经不同浓度硫酸新霉素处理后,各回毛细胞损伤情况.方法 取新生大鼠完整耳蜗基底膜,体外培养12小时,存活贴壁后加药处理.对照组10个样本;3个实验组各10个样本,分别用终浓度为1 mmol/L、2 mmol/L、4 mmol/L硫酸新霉素处理24小时.进行Myosin Ⅶa免疫荧光组织化学染色,在共聚焦显微镜下观察各回毛细胞缺失情况.分别选取10个图片进行毛细胞计数(每张图片截取100μm计数毛细胞个数),并利用CHISS软件进行统计分析.对照组除不加入硫酸新霉素外,其他培养条件均与实验组相同.结果 硫酸新霉素对离体培养的新生大鼠耳蜗毛细胞具有损伤效应,且外毛细胞对硫酸新霉素的毒性作用比内毛细胞敏感.加入硫酸新霉素后,耳蜗毛细胞损失从底回外毛细胞开始,随着药物浓度增加,逐渐累及到中回,最后顶回受累,且损失程度随着浓度的递增而加重,以外毛细胞为甚.单纯体外培养的耳蜗毛细胞没有缺失.经完全随机设计方差分析可得:顶回正常组内毛细胞数量与新霉素1 mmol/L组、2 mmol/L组无统计学差异,与新霉索4 mmol/L组有统计学差异;中、底回正常组内毛细胞数量与新霉素1 mmol/L组、新霉素2 mmol/L组、新霉素4 mmol/L组均有统计学差异;顶回正常组外毛细胞数量与新霉索2 mmol/L与4mmol/L组有统计学差异;中、底回正常组外毛细胞数量与新霉素1 mmol/L组、新霉素2 mmol/L组、新霉素4 mmol/L组均有统计学差异.结论 新生大鼠体外培养的耳蜗毛细胞随着硫酸新霉素药物浓度的增加损失越严重,且从底回向顶回发展,此与活体动物实验的损害规律基本相同,因此可作为耳毒性药物损伤后毛细胞再生研究的体外模型.