依普拉芬对鸡胚成骨细胞的增殖和分化的影响

摘要

目的建立鸡胚额骨成骨细胞的培养方法,研究依普拉芬对其成骨细胞增殖和分化功能的影响.方法采用混合胶原酶和胰酶、两次消化的方法,获取成骨细胞,经培养传代,取状态良好的第3代细胞在96孔板上进行增殖率和碱性磷酸酶活性的测定.结果消化培养的细胞具有明显的成骨细胞的特点:属于成纤维目细胞型、碱性磷酸酶黑染、基质前体红染,长期培养能形成矿化结节.应用依普拉芬后发现10-4mol/L IP可抑制成骨细胞增殖,而10-8mol/L对改善成骨细胞的增殖和分化有显著功效(P＜0.01),小于10-10mol/L浓度的IP则对成骨细胞与对照组无差异.结论酶混合消化可以得到较纯的成骨细胞,应用依普拉芬研究表明,适宜浓度的IP可促进鸡胚额骨成骨细胞增殖和分化,提高其碱性磷酸酶活性,增强成骨细胞矿化,促使骨形成.