脉冲电磁场对大鼠成骨细胞增殖影响的活细胞成像观察研究

摘要

目的 应用活细胞成像技术观察脉冲电磁场作用下大鼠成骨细胞的生长、增殖过程,探讨不同脉冲电磁场强度对大鼠成骨细胞生长、增殖的影响.方法 首先采用MTT法检测在15 Hz,0.1、0.3、0.5、1.0 mT脉冲电磁场连续刺激下,4种脉冲电磁场强度组与对照组的成骨细胞存活与增殖能力,筛选出最佳的脉冲电磁场刺激强度.根据筛选结果,选用频率15 Hz、强度0.1 mT的脉冲电磁场,应用活细胞成像技术,以Time-Lapse方式,对脉冲电磁场刺激组与对照组成骨细胞的生长、增殖过程,作多点平行对照记录,动态观察两组成骨细胞的贴壁速率与分裂速率.并采用MTT法同步检测两组细胞的增殖情况.结果 原代培养3 d的成骨细胞,在15 Hz脉冲电磁场中连续刺激3 d,经MTT法检测,1.0 mT组细胞几乎全部死亡,0.5 mT组与对照组比较细胞增殖能力无明显差别,0.3、0.1 mT组与对照组比较细胞增殖能力增强(P<0.05、P<0.01).活细胞成像Time-Lapse平行对照记录,动态观察分析表明,15 Hz、0.1 mT脉冲电磁场组观察野的细胞贴壁速率与对照组比较无明显差别,分裂速率较对照组观察野增快(P<0.05),MTT法同步检测也证明0.1 mT脉冲电磁场刺激组的细胞增殖能力较对照组增强.结论 15 Hz、0.1 mT脉冲电磁场对体外培养的大鼠成骨细胞增殖具有促进作用,但强度超过0.5 mT的脉冲电磁场对成骨细胞增殖无明显促进作用,如果强度≥1 mT反而会导致成骨细胞的死亡.