人骨形态发生蛋白4(2b)成熟区cDNA的克隆和序列分析

摘要

目的 研究人骨形态发生蛋白４（２ｂ）（ＢＭＰ－４）成熟区ｃＤＮＡ的克隆方法，并进行测序及序列分析。方法 采用异硫氰酸胍一步法从人骨肉瘤细胞株Ｕ－２ＯＳ中提取总ＲＮＡ，通过逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增为ＢＭＰ－４成熟区ｃＤＮＡ基因片段。交在因片段经适当酶切后克隆入载体ｐＵＣ１９中，获得重组质粒ｐＵＣ１９／ＢＭＰ－４。采用Ｓａｎｇｅｒ双脱氧链终止法双向测定核苷酸序列。结果 通过ＲＴ－ＰＣＲ