SS31对大鼠肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤的影响作用及其机制

摘要

目的研究线粒体靶向性小分子多肽——SS31对肾小管上皮细胞缺氧复氧（HR）损伤的影响及其作用机制。方法以大鼠肾小管上皮细胞株NRK--52E细胞为研究对象,建立细胞HR模型,分为对照组、SS31组、HR组、HR+SS31组。四甲基偶氮唑盐实验行细胞损伤检测,annexin V/PI双染色法行细胞凋亡检测,荧光显微镜观察活性氧、线粒体膜电位的变化,蛋白质印迹法检测衔接蛋白p66Shc和磷酸化衔接蛋白p-p66Shc表达,比较组间结果差异。结果HR组细胞活性明显下降,为对照组的（52.2±6.0）%（P＜0.05）;HR+SS31组细胞活性有所提高,呈SS31剂量依赖性。与对照组相比较,HR组细胞凋亡率增加,为（23.03±1.04）%,HR+SS31组（100μmol/L）细胞凋亡率较HR组下降,为（10.37±0.80）%（P＜0.05）。HR+SS31组（100μmol/L）细胞内活性氧的产生明显低于HR组;HR+SS31组（100μmol/L）线粒体膜电位下降较HR组有所改善。对照组细胞中p66Shc和p-p66Shc表达很低;在HR组细胞中,p66Shc和p-p66Shc表达都显著升高,分别为0.93±0.05和0.85±0.04;HR+SS31组（100μmol/L）两种蛋白的表达有所降低,分别为0.58±0.06和0.45±0.04（P＜0.05）。结论SS31可减轻大鼠肾小管上皮细胞HR损伤,其机制可能是通过p66Shc依赖的通路来抑制HR诱导的细胞凋亡和坏死,从而减少细胞损伤。