视网膜Egr-1与细胞外基质重塑通路对闪烁光诱导小鼠近视的调控

摘要

目的探讨Egr-1在低频闪烁光（FL）诱导的小鼠近视中的表达及与细胞外基质重塑通路可能的调控机制。方法 实验研究。将28日龄健康C57BL/6J（B6）小鼠（100只）随机分为正常对照组和FL组。闪烁光组光照频率为2 Hz，明暗周期为50％。分别于实验前，实验后1h、1d、l周、2周、恢复1周（FL诱导2周后撤除FL，于正常光照下继续饲养1周），使用红外偏心验光仪和动物专用A超测定仪测量所有小鼠有眼的屈光度及眼轴。于实验后每个时间点每组各提取10只小鼠右眼的视网膜组织进行RT—PCR检测Egr-1、膜型基质金属蛋白酶1（MTl一MMP）、金属基质金属蛋白酶2 （MMP-2）、组织抑制金属蛋白酶2（TIMp-2）的动态表达．Western Blot及免疫组化、免疫荧光观察Egr-1与MTl-MMP蛋白表达及定位。FL组与对照组各指标组内均数行ANOVA分析，组间均值行独立样本t检验比较分析。结果FL光照2周后．小鼠的屈光度相比对照组发生了近视改变[（0.32±0.14）Dvs．（3.42±0.31）D，t=29.08，P〈0.01]，眼轴也显著增长[（2.97±0.01）mmvs．（2.93±0.01）mm，t=6.914，P〈0．O1]。FL光照1h后Egr-lmRNA和蛋白快速下调．且随诱导时间持续低于正常，MTl-MMPmRNA和蛋白水平快速持续上调，实验1dMMP-2mRNA水平开始上调．趋势与MTl-MMP相同，T1MP-2mRNA在实验1周和2周的时候明显低于正常组。恢复1周后，Egr-1和TIMP．2明显上调，而MTl-MMP和MMP-2表达下调，Egr-l与MTl-MMP呈现负相关关系（r2=O．6478，P〈0．05）。免疫荧光双标示Egr-l与MTl．MMP在视网膜神经节细胞存在共表达。结论视网膜中Egr-1可能通过调控MTl-MMP的表达来影响MMP-2的活化，进而参与闪烁光诱导的小鼠近视的发生及恢复过程。