以异种角膜脱细胞基质为载体构建角膜上皮-载体-内皮复合物的实验研究

摘要

目的 探讨以异种角膜脱细胞基质为载体,体外构建生物角膜的可能性和方法.方法 应用去垢剂1%TritonX-100冷冻干燥处理制备猪角膜脱细胞基质载体,在其上皮面和内皮面分别接种兔角膜上皮细胞和内皮细胞,体外培养2周.将复合物制成组织切片,在光镜下观察组织形态(HE染色),采用免疫组织化学方法检测角膜上皮特异性细胞角蛋白3(CK3),使用锥虫蓝联合茜素红染色观察内皮细胞,在扫描电镜下观察上皮面和内皮面的超微结构.结果 体外培养生物角膜获得上皮、无细胞基质和内皮三层复合结构.4或5层复层上皮中以扁平细胞为主,胞质内特异性CK3表达阳性;内皮层为一连续的单层扁平细胞,细胞活性良好,锥虫蓝联合茜素红染色显示组织呈典型的蜂巢样镶嵌结构.扫描电镜下观察,在载体的上皮面细胞呈复层样生长,形态近似扁平与梭形之间;内皮面为多边形单层细胞,表面具有微绒毛结构.结论 构建的生物角膜为上皮-脱细胞基质载体-内皮复合物,初具角膜的雏形结构.异种角膜脱细胞基质提供了良好的细胞生长界面,有望成为体外构建角膜的载体材料.