生物信息学筛选的合成小肽抑制小鼠角膜新生血管的实验研究

摘要

目的 初步探讨人载脂蛋白a[apo(a)]kringle V(KV)抗新生血管活性区域的氨基酸序列,并评价其对血管内皮生长因子(VEGF)诱导小鼠角膜新生血管的抑制作用.方法 应用生物信息学方法,从序列比对、抗原性、表面接触性及亲水性预测方面分析apo(a)KV氨基酸序列的结构和生物学特性,筛选出其中的可能活性肽段固相合成此小肽.应用小鼠角膜微囊袋模型,检测小肽对VEGF诱导新生血管的作用.按照随机数字表法,将40只C57BL/6小鼠(40只眼)分为对照组、A组、B组和C组4个组,每组10只眼,在各组角膜基质层内植入160 ng VEGF的同时依次植入0.0、0.5、1.0和1.5 μg小肽缓释颗粒.术后7 d摄片观察角膜新生血管长入情况,并行组织病理学检查.结果 生物信息学分析显示筛选出的小肽含有较多保守氨基酸残基,且较apo(a)KV中其他肽段有良好的抗原性、表面接触活性和亲水性等反应特性.B、C组角膜新生血管的最长血管长度、钟点数和面积与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01),C组与B组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),上述3个指标A组与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 筛选出的小肽在一定剂量时对VEGF诱导的小鼠角膜新生血管有明显的抑制作用,其氨基酸序列可能位于apo(a) KV抗新生血管的活性位点内.(中华眼科杂志,2007,43:151-157)