高氧诱导小鼠视网膜病变模型中血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子的表达及意义

摘要

目的研究高氧诱导小鼠视网膜病变模型中血管内皮生长因子（VEGF）和色素上皮衍生因子（PEDF）的表达和意义,并探讨两者在视网膜新生血管形成过程中的作用。方法对照实验研究。对新生 C57BL-6N 系小鼠给予高氧后,置相对低氧环境中饲养,诱导产生视网膜新生血管。在小鼠生后第12、14及17天摘除眼球,通过逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法及荧光素灌注造影,分别检测不同时间点全视网膜新生血管组织对 VEGF 与 PEDF 的 mRNA 和蛋白质的表达水平的差异,并观察视网膜新生血管的分布与形态变化,通过血管内皮细胞计数对新生血管进行量化。应用 SPSS11.5统计学软件,采用析因设计方差分析,分别比较实验组与对照组 mRNA 与蛋白质表达水平的差异,以 P＜0.05作为差异有统计学意义。结果在高氧环境中（出生第12天小鼠）,OIR 模型鼠VEGF 蛋白质表达 A 值（0.47±0.12）较正常鼠（1.81±050）下降,PEDF 蛋白质表达 A 值（5.35±0.94）较正常鼠（0.68±0.17）明显升高;而相对低氧环境中（出生第14和17天小鼠）,VEGF 蛋白质表达 A 值（2.15±0.46,5.49±0.97）较正常鼠（0.90±0.05,0.88±0.91）明显升高,PEDF 蛋白质表达A值（2.07±0.35,1.37±0.48）较正常鼠（2.62±0.68,5.30±0.59）明显下降,尤以第17天下降显著。对不同时间点 VEGF 和 PEDF 蛋白质表达水平进行析因方差分析,结果显示各时间点的 VEGF蛋白质表达水平差异有统计学意义（F=70.450,P=0.000）,各时间点的 PEDF 蛋白质表达水平差异有统计学意义（F=160.237,P=0.000）。出生第12、14及17天小鼠视网膜 VEGF 蛋白质的表达与正常对照组比较,差异有统计学意义（P=0.009,0.010,0.000）,PEDF 蛋白质的表达差异也有统计学意义（P=0.002,0.046,0.000）;出生第12、14及17天小鼠视网膜 VEGF mRNA 的表达与正常对照组比较,差异有统计学意义（P=0.001,0.000,0.001）,PEDF mRNA 的表达差异也有统计学意义（P=0.000,0.001,0.000）。伴随着视网膜组织的缺氧,出现了 VEGF 蛋白质表达水平升高和 PEDF 蛋白质表达水平降低,导致视网膜组织中 VEGF 与 PEDF 蛋白质表达失衡;VEGF 与 PEDF 的 mRNA 表达亦发生类似变化,且较蛋白质改变提前发生。上述改变均伴随着同期视网膜新生血管的发生、发展及其严重程度而逐渐加重。结论 VEGF 和 PEDF 的 mRNA 和蛋白质表达失衡可能是造成视网膜新生血管发生的机制之一。（中华眼科杂志,2008,44:734-740）