肝细胞核因子4γ在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖和干性的影响

摘要

目的探讨肝细胞核因子4γ（HNF4γ）在胃癌细胞增殖和干性维持中的作用及机制。方法收集2012—2015年在郑州大学第一附属医院行胃癌根治术患者的胃癌及相应癌旁正常组织蜡块102例, 新鲜组织42例。分别采用实时荧光定量聚合酶链反应、逆转录聚合酶链反应和免疫组化法检测HNF4γ的表达情况。建立HNF4γ过表达胃癌细胞株AGS-HNF4γ和HNF4γ沉默细胞株HGC27-shHNF4γ, 分别采用XTT细胞增殖、平板克隆实验、干细胞成球实验测定HNF4γ过表达和沉默对胃癌细胞增殖和干性的影响, Western blot检测CD44的表达。结果 42例新鲜胃癌组织中, HNF4γ mRNA的表达水平为12.43±2.702, 高于相应癌旁正常组织3.639±1.109（P＆0.010）。102例石蜡包埋胃癌组织中, 41.2%（42/102）HNF4γ蛋白表达阳性, 高于癌旁正常组织的8.8%（9/102, P＆0.001）。HNF4γ蛋白表达与胃癌患者的分化程度、浸润深度、临床分期和淋巴结转有关（均P＆0.05）。HNF4γ蛋白高表达组患者的中位生存时间为25个月, 3年生存率为4.8%（2/42）, HNF4γ蛋白正常表达组患者的中位生存时间为38个月, 3年生存率为51.7%（31/60）, 差异均有统计学意义（均P＆0.001）。AGS-HNF4γ细胞增殖快于对照AGS-Vector细胞, 细胞克隆数高于AGS-Vector细胞[分别为（243.5±24.5）个和（81.0±16.0）个, P=0.030],细胞成球率高于AGS-Vector细胞[分别为（83.5±3.9）%和（21.8±5.6）%, P=0.010], CD44的表达量高于AGS-Vector细胞。HGC27-shHNF4细胞增殖慢于对照HGC27-Vector细胞, 细胞克隆数低于HGC27-Vector细胞[分别为（26.0±1.0）个和（83.5±4.5）个, P=0.006], 细胞成球率低于HGC27-Vector细胞[分别为（20.8±8.4）%和（72.5±4.8）%, P=0.030], CD44的表达量低于HGC27-Vector细胞。结论 HNF4γ在胃癌组织中异常高表达, 与胃癌患者的不良预后有关。HNF4γ可促进胃癌细胞的增殖, 并通过促进CD44的表达维持胃癌细胞的干性。