丝氨酸蛋白酶抑制剂E2通过激活β-catenin促进食管鳞癌细胞迁移和侵袭

摘要

目的探讨丝氨酸蛋白酶抑制剂E2（SERPINE2）在食管鳞癌细胞迁移和侵袭中的作用及相关分子机制。方法运用TCGA（http://gepia.cancer-pku.cn/detail.php和http://ualcan.path.uab.edu/index.html）数据库对SERPINE2在食管癌中的表达进行分析。采用定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测正常食管上皮细胞NE2、食管鳞癌细胞KYSE30和KYSE150中SERPINE2 mRNA的表达。在KYSE30细胞中转染SERPINE2敲降或过表达质粒, 以qRT-PCR法检测表达效果。采用体外迁移侵袭实验分析SERPINE2与食管鳞癌细胞迁移和侵袭的关系。采用免疫荧光、qRT-PCR和Western blot等实验检测SERPINE2与β-catenin和靶基因c-Myc、cyclin D1和CD44表达的相关性。结果数据库中182例和95例食管癌和食管鳞癌组织样本中, SERPINE2 mRNA在食管癌和食管鳞癌组织中表达均增高（P＆0.05）;SERPINE2在食管鳞癌KYSE30和KYSE150细胞中均呈高水平表达（P＆0.01）。对照组细胞的迁移和侵袭数分别为（212.66±24.11）个/视野和（136.00±14.42）个/视野, SERPINE2敲降组1细胞的迁移和侵袭数分别为（88.33±9.71）个/视野和（77.00±9.53）个/视野, SERPINE2敲降组2细胞的迁移和侵袭数分别为（66.00±8.00）个/视野和（45.66±3.78）个/视野, 与对照组相比, 差异均有统计学意义（均P＆0.01）。对照组细胞的迁移和侵袭数分别为（250.00±30.00）个/视野和（203.33±15.27）个/视野, SERPINE2过表达组细胞的迁移和侵袭数分别为（383.33±35.11）个/视野和（246.66±25.16）个/视野, 与对照组比较, 差异均有统计学意义（均P＆0.01）。SERPINE2过表达组细胞中β-catenin表达上调, p-β-catenin表达下调, β-catenin转录活性增强, c-Myc、cyclin D1和CD44 mRNA表达上调。在对照组和SERPINE2过表达组细胞培养基中分别加入iCRT14后, 对照组和SERPINE2过表达组细胞的迁移数分别为（200.00±36.05）个/视野和（258.33±22.54）个/视野, 侵袭数分别为（160.00±17.32）个/视野和（188.33±25.65）个/视野, 与未加入iCRT14组比较, 差异均有统计学意义（均P＆0.01）。结论 SERPINE2在食管鳞癌细胞中表达增高, 通过激活β-catenin在促进食管鳞癌细胞迁移和侵袭中发挥重要的作用。