重组表皮生长因子受体噬菌体疫苗的抗肿瘤效果

摘要

目的构建重组表皮生长因子受体（EGFR）噬菌体疫苗,并观察其抗肿瘤效果。方法将鸡源EGFR膜外部分的5个基因片段插入T7噬菌体表达系统中,EGFR蛋白以融合蛋白的形式表达在噬菌体的外壳蛋白10B上,从而构建成噬菌体疫苗。Western blot方法检测噬菌体壳蛋白的EGFR表达,ELISA方法检测免疫小鼠血清中抗EGFR抗体。分离免疫小鼠脾细胞,检测淋巴细胞对靶细胞A431的细胞毒作用。C57BL／6J小鼠经过4次免疫,接种Lewis肺癌细胞,记录肿瘤的生长情况,评价疫苗的抗肿瘤效果。结果成功构建5种鸡源EGFR噬菌体疫苗REPV-C1、REPV-C2、REPV-C3、REF-C4和REPV-C5。Western blot结果显示,噬菌体壳蛋白上有EGFR表达。经免疫的小鼠血清中可检测到抗EGFR抗体。免疫后的小鼠脾细胞对EGFR受体高表达的A431细胞具有杀伤作用,效靶比为10:1时,最大杀伤率可达45．74％±7．21％。肿瘤生长曲线显示,免疫后的C57BL／6J小鼠Lewis肺癌生长受到明显抑制。结论重组EGFR噬菌体疫苗具有抗肿瘤效果,利用噬菌体表达技术构建噬菌体疫苗是一种有效的抗肿瘤方法。