HSP70-Id复合物修饰的树突状细胞体外诱导特异性抗肿瘤作用

摘要

目的 观察人慢性B淋巴细胞性白血病(B-CLL)细胞的独特型抗原Id-ScFv与热休克蛋白70(HSP70)形成复合物修饰的树突状细胞(DC)体外诱导特异性抗肿瘤作用,并初步探讨其机制.方法 将HSP70与Id-ScFv体外结合形成复合物HSP70-Id,修饰自人外周血单核细胞获取的DC.倒置相差显微镜观察DC的形态特征,流式细胞仪检测修饰前后DC的表型变化,酶联免疫吸咐试验(ELISA)检测DC分泌的白细胞介素12(IL-12)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测修饰的DC对自身淋巴细胞的激活和增殖作用,流式细胞仪检测激活的自身淋巴细胞T细胞亚群的变化,台盼蓝染色法检测其对Daudi、K562和HepG2等细胞的杀伤作用.结果 DC体外诱导培养成功,HSP70-Id复合物可使DC成熟,镜下可见典型的DC形态,其CD1a表达率为20%～30%,CD83表达率＞72%,CD86和HLA-DR表达显著增加(P＜0.05),上清中IL-12、TNF-α亦显著高于DC对照组(P＜0.01).HSP70-Id复合物修饰的DC激活自身淋巴细胞,对Daudi细胞的杀伤率为71.24%,而对K562细胞杀伤作用较弱,对HepG2细胞无明显作用.其淋巴细胞亚群中,CD4+T细胞、CD8+T细胞的比例均显著增加,分别为56.51%和70.21%,CD4+T细胞/CD8+T细胞比值由空白对照组的1.49倒置为0.81.结论 HSP70-Id复合物修饰的DC生物学活性增强,经其刺激后,传代培养的淋巴细胞可产生高效而特异性的抗肿瘤免疫效应,可能是CD4+T细胞、CD8+T细胞及DC协同作用的结果.