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术中失血来源的树突状细胞用于肝癌治疗的体外实验研究

         

摘要

目的探讨从肝癌患者术中失血来源的单个核细胞中培养树突状细胞(DC)的可行性,为个体化的 DC 介导免疫治疗提供新的细胞来源。方法采集9例原发性肝细胞癌患者术中失血及8例脐血,分离其单个核细胞,其中贴壁的单个核细胞经重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(RHGM-CSF),重组人白细胞介素4(rhIL-4)诱导和负载癌细胞抗原,制成不同的 DC 瘤苗,悬浮的单个核细胞经细胞因子处理成为细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)。采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法测定 DC 激活同源 CIK 的相对增殖率和 CIK 对肝癌细胞的杀伤效果。结果肝癌患者术中失血来源的单个核细胞在体外能够诱导分化为具有典型形态和表型的 DC。术中失血来源的 DC 表面标志物表达水平低于脐血来源的 DC,但二者均能有效地激活 CIK,并增强其对肝癌细胞的杀伤活性。负载患者自身癌细胞抗原的术中失血 DC 和脐血 DC,其激活的 CIK 增殖率分别为(388.9±137.3)%和(315.1±44.5)%,对肿瘤细胞的杀伤率分别为(87.1±8.0)%和(90.0±5.1)%;而负载 SMMC-7721抗原的术中失血 DC 和脐血 DC,其激活的 CIK 增殖率分别为(239.9±48.7)%和(226.3±32.3)%,对肿瘤细胞的杀伤率分别为(76.4±7.9)%和(81.1±4.3)%。在激活 CIK 和增强对肝癌细胞杀伤能力方面,相同抗原负载的两种 DC 差异无统计学意义,但负载自身抗原优于负载 SMMC-7721抗原。结论肝癌患者术中失血来源的 DC 可有效激活 CIK,并增强其对肝癌细胞的杀伤效应,为临床研究和应用 DC 瘤苗提供了一个新的来源。

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