小鼠骨髓来源调节性树突状细胞的体外培养和鉴定

摘要

目的：变应性鼻炎的除了药物和脱敏治疗之外，目前科学家正在探索新的治疗方法，本研究诱导小鼠骨髓来源调节性DC的生成，及NF-K B基因在其中的表达,探讨其发挥免疫作用的机制.方法:分离、提纯小鼠骨髓来源树突状细胞，分为四组进行体外培养，分别标记为A、B、C、D。培养过程中A, B组培养液中加入GM-CSF+IL-4,C，D组培养液中加入GM-CSF+IL-10+TGF-β1，培养第3天，弃去上清，去除悬浮细胞，加入新鲜培养液，补充细胞因子，之后隔天半量换液，至第8天，B,D组给予LPS刺激48h，促进细胞进一步分化。倒置显微镜观察细胞生长情况，记录生长变化。收集第10天的各组细胞及上清液，通过流式细胞仪，ELISA以及RT-PCR的方法对细胞进行鉴定和检测。结论：体外成功诱导出骨髓来源调节性树突状细胞，发现IL-10. SOCS1基因表达在调节性树突状细胞形成过程中发挥重要作用，为临床免疫性疾病的治疗开辟新的途径。