姜黄素诱导不同分化程度胃癌细胞凋亡及保护性自噬

摘要

目的探讨姜黄素诱导不同分化程度胃癌细胞的凋亡及保护性自噬作用。方法采用一定梯度浓度的姜黄素处理不同分化程度的胃癌细胞株BGC-823和MKN-28,采用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞的增殖情况,采用流式细胞术分析细胞的凋亡情况,采用吖啶橙染色观察细胞自噬的发生,采用Western blot检测细胞中凋亡通路相关蛋白和自噬标记蛋白的表达。结果姜黄素以剂量和时间依赖的方式抑制BGC-823和MKN-28细胞的活力。姜黄素作用48 h后,BGC-823和MKN-28细胞的药物半数抑制浓度(IC50)趋于接近,分别为15.18和15.84μmol/L,差异无统计学意义（P=0.513）。流式细胞术检测结果显示,体外处理48 h后,姜黄素以剂量依赖的方式促进胃癌细胞的凋亡。Western blot检测结果显示,姜黄素可促进BGC-823和MKN-28细胞中bax、active-caspase-3和active-caspase-9凋亡相关蛋白的表达,下调bcl-2的表达。姜黄素处理BGC-823和MKN-28细胞48 h后,可诱导胃癌细胞质中酸性囊状小体的形成、LC3亚型转换以及Beclin1、Atg7和Atg5-Atg12等自噬相关蛋白表达水平的升高。姜黄素可显著抑制胃癌细胞中PI3K/Akt/mTOR信号通路的活化。在姜黄素处理胃癌细胞的体外培养体系中,加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤,可促进胃癌细胞的凋亡。结论姜黄素可在体外诱导不同分化程度的胃癌细胞凋亡性死亡和保护性自噬的发生,自噬抑制剂联合姜黄素可明显增强姜黄素的抗癌效果。