肿瘤相关巨噬细胞分泌的抗菌肽cathelicidin促进小鼠结直肠癌生长的作用及机制

摘要

目的研究肿瘤相关巨噬细胞分泌的抗菌肽cathelicidin促进小鼠结直肠癌生长的作用及机制。方法通过氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠（AOM/DSS）方法建立小鼠肠炎相关的结直肠癌模型。对诱导成瘤的小鼠,同时每隔3 d注射1次小鼠cathelicidin中和抗体、IgG抗体（阳性对照）和PBS（阴性对照）,持续1个月,取小鼠结肠,拍照、计数肿瘤数目并进行评价。利用实时荧光定量PCR和Western blot法检测小鼠结肠肿瘤组织、非肿瘤组织以及组织中巨噬细胞cathelicidin的表达;采用免疫组化法检测小鼠结肠肿瘤组织与非肿瘤组织中的cathelicidin、肿瘤增殖抗原Ki-67和CD68的表达;采用原位末端转移酶标记技术（TUNEL）检测小鼠结肠肿瘤组织中细胞的凋亡情况。结果 cathelicidin在小鼠结肠肿瘤组织的炎症免疫细胞（巨噬细胞）中呈高表达状态,而在肿瘤细胞中表达较弱。注射cathelicidin中和抗体组小鼠的肿瘤数目和长径分别为（4.50±1.18）个和（1.74±0.18）mm,明显低于注射PBS组小鼠的肿瘤数目[（13.88±1.98）个,P＜0.01]和肿瘤长径[（3.74±0.38）,P＜0.01];也明显低于注射IgG抗体小鼠的肿瘤数目[（15.25±1.82）个,P＜0.01]和肿瘤长径[（3.40±0.36）mm,P＜0.01]。注射cathelicidin中和抗体组肿瘤组织中Ki-67阳性肿瘤细胞百分比为（28.20±3.44）%,低于注射PBS组[（68.20±3.51）%,P＜0.01]和注射IgG抗体组[（69.20±3.41）%,P＜0.01]。免疫组织化学染色检测结果显示,注射cathelicidin中和抗体组小鼠组织中CD68的表达明显低于注射IgG抗体组和注射PBS组。TUNEL染色显示,注射cathelicidin中和抗体对肿瘤细胞的凋亡影响不大。结论肿瘤相关巨噬细胞分泌的cathelicidin具有促进小鼠结直肠癌增殖的作用,中和cathelicidin的表达可以抑制结直肠癌的生长和增殖。cathelicidin通过募集炎症细胞（巨噬细胞）进入肿瘤微环境可能是其促进结直肠癌增殖的主要作用机制。