雷公藤内酯抑制热休克蛋白70逆转MKN45胃癌细胞阿帕替尼耐药

摘要

目的探讨热休克蛋白70（HSP70）特异性抑制剂雷公藤内酯逆转胃癌细胞MKN45阿帕替尼耐药的作用。方法以阿帕替尼、雷公藤内酯、阿帕替尼联合雷公藤内酯处理胃癌耐药细胞MKN45/AR及胃癌敏感细胞MKN45,采用CCK-8实验检测半数抑制浓度(IC50),比较阿帕替尼单独及联合雷公藤内酯对MKN45和MKN45/AR细胞活性的影响。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测MKN45细胞耐药前后的HSP70基因（HSPA1A和HSPA1B）的mRNA表达情况,采用Western blot法检测HSP70的蛋白表达水平。结果阿帕替尼对MKN45细胞的IC50为10.411μmol/L,对MKN45/AR细胞的IC50为70.527μmol/L两者差异有统计学意义（P＜0.05）。HSPA1A mRNA和HSPA1B mRNA在MKN45/AR细胞中的表达水平远高于MKN45细胞（P＜0.001）。0.25μmol/L雷公藤内酯作用于MKN45/AR细胞后,HSP70的表达水平明显下降（P＜0.01）,阿帕替尼对MKN45/AR细胞的IC50降为11.679μmol/L,与单纯使用阿帕替尼时相比,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论在阿帕替尼耐药的胃癌细胞MKN45/AR中,HSP70表达明显升高。低剂量的雷公藤内酯可以明显抑制MKN45/AR细胞中HSP70的表达,MKN45/AR细胞对阿帕替尼的耐药性明显下降,抑制HSP70的表达是克服阿帕替尼耐药性的方法之一。