大豆脂肪酸脱氢酶GmFAD3C-1基因的克隆及功能分析

摘要

研究通过对大豆脂肪酸脱氢酶GmFAD3家族中4个关键酶基因序列进行比对,与对照JN18相比,大豆低亚麻酸突变体MT72中GmFAD3C-1基因在起始密码子后+966bp处存在一个碱基位点的缺失(G→•),产生移码突变,导致氨基酸序列上产生较大变化(该突变基因命名为gmfad3c-1)。构建GmFAD3C-1基因超表达及CRISPR/Cas9编辑载体,利用花粉管通道法获得T_(2)转化植株。脂肪酸脱氢酶酶活测定结果显示,超表达植株T_(2)籽粒中,酶活与对照相比上升47.62%~78.85%,编辑载体T_(2)籽粒中,酶活与对照相比下降25.67%~47.11%。脂肪酸相对含量测定的结果进一步表明,GmFAD3C-1基因的表达与植株亚麻酸含量密切相关。