白菜型油菜八氢番茄红素合酶基因BrPSY的克隆与序列分析

摘要

八氢番茄红素合酶(PSY)是类胡萝卜素合成途经的第一个关键限速酶,对类胡萝卜素合成起着重要的控制作用.本研究利用电子克隆技术,从油菜EST数据库中找到与拟南芥PSY基因高度同源的油菜EST序列,通过人工拼接及RT - PCR、RACE的方法,克隆得到白菜型油菜BrPSY基因全长cDNA的序列,提交GenBank,被命名为BrPSY( GenBank登记号EU138883).BrPSY包含168bp的5,前导序列、69bp的3,不翻译序列和1 278bp的完整开放读码框(ORF),编码47.6 kDa的蛋白质.序列比对结果表明,BrPSY蛋白与其它植物的PSY蛋白具有很高的相似性；系统进化树分析表明,BrPSY与拟南芥亲缘关系最近.在全长cDNA序列的基础上,设计引物从白菜型油菜DNA中克隆得到BrPSY基因的全长DNA序列,含有7个外显子和6个内含子.