缺氧对牛视网膜色素上皮细胞增生和凋亡基因 bcl-2表达的影响

摘要

目的观察缺氧对培养的牛视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞增生和凋亡基因bcl-2表达的影响. 方法用四甲基偶氮唑蓝 [ 3-(4,5-dimethylthiazole-2yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromid, MTT]比色法和免疫组织化学的方法,将培养的RPE细胞接种于24孔板,每孔细胞密度为5×104,分成4组:A组置入缺氧环境中培养(3%O2,5%CO2,92%N2,37℃);B组置入正常环境中培养(5%CO2,95%空气,37℃);C组:将缺氧环境培养24 h的细胞上清液加到正常环境培养的牛 RPE细胞中培养;D组:将正常环境培养24 h的细胞上清液加到正常环境培养的牛 RPE细胞中培养.24 h后分别取出行MTT比色法及抗bcl-2蛋白抗体染色. 结果 A组与B组、C组与D组比较,前者细胞MTT实验吸光度(A)值[旧称光密度(OD)]均高于后者(P＜0.05); 抗bcl-2蛋白抗体染色,A、B组阳性率分别为72.60%、38.64%; C、D组阳性率分别为83.20%、21.80%.阳性染色在细胞浆,近核膜处染色尤深,部分呈细颗粒状. 结论缺氧促进牛 RPE细胞增生及凋亡基因 bcl-2表达.