家兔自体虹膜色素上皮移植细胞制备的研究

摘要

目的探讨自体虹膜色素上皮(iris pigment epithelium,IPE)细胞移植时虹膜取材的较佳方法. 方法在20只黑兔眼上按人眼周边虹膜切除术的步骤,分别在左眼(A法,在12点处切取底边为4～5 mm的三角形虹膜组织1块)、右眼(B法,在11点和1点两处切取底边为2～2.5 mm的三角形虹膜组织块2块)取材,采用酶-显微解剖-酶分离法对IPE细胞进行精细的分离和培养,并用光学显微镜、电子显微镜和免疫组织化学等方法对培养的细胞进行观察和鉴定.结果A法取材的IPE细胞培养成功率为65%,B法取材的成功率为95%,经3～4代的传代即达到移植所需的细胞数.显微镜及免疫组织化学方法观察结果显示,培养的IPE细胞基本保持了原代细胞的特性,细胞活力为85%～93%.结论B法取材的IPE细胞培养成功率高于A法,培养的IPE细胞在传代到第3代时即可进行移植.