转化生长因子-β在激光诱导脉络膜新生血管形成中的作用

摘要

目的观察转化生长因子-β（TGF-β）在激光诱导脉络膜新生血管形成（CNV）中的作用。方法 6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠80只随机分为正常对照组、光凝模型组、光凝加磷酸盐缓冲液（PBS）对照组（PBS对照组）、光凝加TGF-β受体抑制剂组（TGF-β受体抑制剂组）,每组20只。光凝模型组、PBS对照组及TGF-β受体抑制剂组小鼠均采用激光光凝诱导CNV形成。激光光凝后1、2、3、4周,对正常对照组及光凝模型组小鼠行荧光素眼底血管造影（FFA）检查,动态观察小鼠模型CNV的形成情况;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测正常对照组及光凝模型组小鼠视网膜内TGF-β的蛋白表达以及正常对照组、PBS对照组、TGF-β受体抑制剂组小鼠视网膜内VEGF和TNF-α的蛋白表达。激光光凝后2周,作视网膜色素上皮细胞/脉络膜组织铺片,采用荧光染色计算各组CNV面积。结果 FFA检查结果显示,正常对照组小鼠视网膜血管以视盘为中心呈放射状走行,脉络膜血管呈网状分布;激光光凝后1周,光凝模型组小鼠光凝区可见荧光素渗漏呈盘状强荧光团。Western blot检测结果显示,光凝模型组小鼠视网膜内TGF-β蛋白表达随激光光凝时间延长而逐渐升高。光凝模型组与正常对照组小鼠视网膜内TGF-β蛋白表达比较,差异有统计学意义（F=13.042,P＜0.05）。激光光凝后1、2、3、4周,PBS对照组、TGF-β受体抑制剂组小鼠视网膜内TNF-α（F=14.721、17.509）、VEGF（F=18.890、11.251）蛋白表达均较正常对照组明显增加,差异均有统计学意义（P＜0.05）。与PBS对照组比较,TGF-β受体抑制剂组小鼠视网膜内TNF-α、VEGF蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义（F=21.321、16.160,P＜0.05）。激光光凝后2周,TGF-β受体抑制剂组小鼠脉络膜内CNV面积明显小于PBS对照组及光凝模型组,差异均有统计学意义（F=4.482,P＜0.05）。结论 TGF-β可能通过上调TNF-α和VEGF蛋白表达水平促进CNV形成,应用其抑制剂可以减少CNV形成。