明睛颗粒对激光诱导脉络膜新生血管小鼠骨髓来源细胞脉络膜趋化黏附的影响

摘要

目的:观察中药制剂明睛颗粒对激光诱导脉络膜新生血管(CNV)小鼠外周血骨髓来源细胞(BMCs)在CNV趋化和黏附的影响.rn 方法:将75只C57BL/6J小鼠按随机数字表方法随机分为3组:干预组、对照组、正常空白组.干预组和对照组各30只小鼠,正常空白组15只小鼠.干预组和对照组小鼠采用氪激光光凝诱导CNV发生.激光造模后0.5～1 h给予尾静脉注射绿色荧光蛋白(GFP)转基因小鼠的BMCs.造模后第1天干预组小鼠予以明睛颗粒溶剂每日灌胃直至处死取样,每只小鼠灌胃0.3 ml,相当于30 g/(kg·d)生药;对照组予以等体积蒸馏水灌胃;正常空白组小鼠常规喂养.分别在灌胃干预后第7、14、28 天,采用脉络膜铺片观察CNV及BMCs在CNV处的趋化和黏附情况;光学显微镜观察小鼠视网膜脉络膜组织病理改变;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠外周血趋化因子受体4(CXCR4)的含量;免疫荧光法观察基质细胞衍生因子-1(SDF-1α)、血管细胞黏附分子(VCAM-1)、细胞间黏附分子(ICAM-1)在CNV 区域的表达.rn 结果:脉络膜铺片观察显示,干预组和对照组均可见CNV 生成,而正常空白组均未见CNV;明睛颗粒干预后第7、14天,干预组CNV中BMCs明显少于对照组,CNV面积亦较对照组小(t=10、9,P=0.007、0.024).光学显微镜观察显示,干预组视网膜脉络膜病变较对照组轻.ELISA 检测结果显示,干预后7、14天干预组外周血CXCR4含量明显低于对照组(t=8.107、2.747,P＜0.05);免疫荧光法检测结果显示,干预组CNV区域SDF-1α、ICAM-1、VCAM-1表达较对照组减弱.rn 结论:中药制剂明睛颗粒能在CNV形成早期抑制外周血BMCs在CNV的趋化和黏附及参与CNV形成作用.其机制可能与明睛颗粒减少外周血及CNV周围趋化因子和黏附因子的蛋白表达有关.